LC/MS/MS液质联用仪法定量分析全氟辛酸

 摘要建立了用Agilent 6410三重串联四极杆质谱仪分析全氟辛酸(PFOA)的方法。在一根快速分离高通量C18柱（粒径1.8 µm）上，用含有10 mM醋酸铵的水和甲醇为流动相，进行简单的等度洗脱，PFOA的保留时间仅为2.3分钟。在从9 fg/µL到150 pg/µL 4个数量级的范围内呈良好的线性，9 fg/µL浓度水平上的峰面积重现性好，RSD为5.5 %，该浓度下的平均信噪比(S/N)为7.2。相当于检测地表水提取物所需要的灵敏度。

引言全氟辛酸(PFOA)是合成的化学物质，不是天然存在的。各公司使用PFOA制造含氟聚合物，这些聚合物是应用价值的物质，具有阻燃、抗油、防污、防油脂等特点。毒理学研究表明，接触PFOA可引发生殖／发育毒性、肝损伤，并可能致癌。PFOA在环境中长期存在，已经发现在环境和普通美国人群的血液中都有低水平含量的PFOA。EPA近期研究表明，需要加强测试和监测PFOA的量。欧盟要求饮用水中PFOA < 100 ppt。在本研究中，测定了浓度范围从9 fg/µL到150 pg/µL的PFOA标准溶液，校正曲线的线性相关系数为R2 >0.997。到1,500 pg/µL浓度水平时不再呈线性。9 fg/µL浓度连续进样6次测定重复性。最浓度下根据所测的峰面积计算得到的RSD为5.5%。进样体积为10 µL，因此这一低浓度的进样量仅为90 fg。PFOA的结构式如下所示：CF3 – (CF2)6 – COOH该分子为羧酸，电喷雾电离(ESI)负离子模式应有较高的灵敏度。

实验部分样品制备PFOA母液浓度为1,500 ng/µL。用甲醇稀释成0.009、0.015、0.15、0.45、0.75、1.5、15.0、150和1,500 pg/µL一系列浓度。LC/MS 方法结果与讨论图1是校正曲线。测定浓度(9 fg/µL)重复进样9次。15 fg/µL浓度也重复进样9次。如图2所示，浓度为9 fg/µL时，峰面积重复性为5.5% RSD。定义1到1.5分钟内为噪音，该浓度下的信噪比为7.2。LC条件Agilent 1100 系列二元泵、脱气机、多孔板进样器和柱温箱。色谱柱: Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHT C18,2.1 mm × 100 mm, 1.8 µm (部件号 959764-902)柱温: 40 °C流动相: A = 10 mM 醋酸铵水溶液，B = 10 mM 醋酸铵溶于80:20甲醇/水流速: 0.3 mL/min进样量: 10 µL等度: 85% B停止时间: 3 分钟针头清洗: 75:25 甲醇/水；冲洗10 秒MS条件离子化模式: Agilent G1948B离子源，ESI负离子模式雾化器: 35 psig干燥气流速: 10 L/min干燥气温度: 300 °CVcap: 4,000 V分辨率 (FWHM): Q1 = 0.7 amu; Q2 = 0.7 amuMRM transition: m/z 413.0 > 369.0碰撞诱导解离电压: 67 V碰撞能量: 3 V驻留时间: 200 msec

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将1,500 pg/µL浓度添加到校正曲线中，就会看到图3中的结果，需要对数据进行2次曲线拟合。但可以看出，其相关系数良好R2 > 0.99999。

结论全氟辛酸化合物对负离子电喷雾电离模式非常敏感。标准液在9 fg/uL到150 pg/µL范围内显示了非常好的线性，相当于柱上进样量在90 fg到1.5 ng之间。在9 fg/µL测定的低浓度下峰面积的重复性为5.5%RSD，这个浓度下连续进样的平均信噪比为7.2。可以看出1,500 pg/µL，或柱上15 ng时出现信号饱和。由于饮用水是比较干净的基质，预计测定实际样品时也能达到类似的灵敏度