ACQUITY UPLC M-Class，质谱灵敏度提升好帮手！

生物分离分析领域的分析科学家经常面临多种挑战，如对复杂样品中低丰度的蛋白质进行鉴定和定量。由于生物样品数量有限，基质干扰强烈，为了在有限条件下实现更高灵敏度的分析，分析科学家们通常通过提高质谱仪的灵敏度、使用更细内径的色谱柱、改造LC系统来改善LC/MS分析表现。常规LC系统改造策略，如进行管路改造或分流，虽然解决了LC系统的管路内径较大易导致样品扩散损失的问题，但往往会导致结果的重现性差，仪器性能不稳定，从而影响了分析的准确性和可靠性。为了解决以上难题，沃特世于2014年推出ACQUITY UPLC M-Class液相系统，致力于为分析科学家提供高灵敏、更可靠的实验结果。

图1. ACQUITY UPLC M-Class系统。

作为涵盖纳升级至微升级流速范围的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色谱系统，ACQUITY UPLC M-Class不仅提供了优异的UPLC分离性能，还兼容不同规格的色谱柱，流速范围200 nL/min~100 μL/min，可灵活配置HDX技术、2D色谱和紫外检测器，适用于不同领域的各类应用。作为质谱仪的前端接口，该系统与高分辨质谱联用，能够对复杂样品进行深度分析表征和研究；而与四极杆质谱联用，则适用于多肽、代谢物的定量分析或其他靶向性分析工作，如生物标记物的验证等，其出色的灵敏度满足了日益增长的分析需求，为科学家们解决复杂的分析难题提供了有力支持。

图2. 采用ACQUITY UPLC M-Class系统的HDX-高分辨质谱仪平台。

图3. 左图显示了在线胃蛋白酶消化后钙调蛋白肽段的色谱分离图。右图显示了从10秒到240分钟标记的肽段（ADIDGDGQVNY）的质谱结果。随着在D₂O中暴露时间延长，m/z值会随之增加。

采用ACQUITY UPLC M-Class系统的HDX平台可充分利用UPLC的分离能力，与高分辨质谱联用实现对蛋白质构象的细微变化进行定量分析。HDX数据有助于监测蛋白质构象，定位结合位点和构象变化区域，为候选药物与靶蛋白的结合、生物制药产品开发、蛋白质间相互作用等研究提供信息。

图4. ACQUITY UPLC M-Class系统与串联四极杆联用。

图5. ionKey/MS系统iKey HSS T3, 100Å, 1.8 µm, 150 µm×100 mm与ACQUITY UPLC 2.1 mm内径色谱柱结果对比。与ACQUITY UPLC 2.1 mm内径色谱柱相比，当注入相同体积时，使用ionKey/MS系统能够使mafei的检测灵敏度提高9倍。

微流级ACQUITY UPLC M-Class系统与使用ionKey技术的串联四极杆联用，有效提高了电喷雾质谱的电离效率，节约了流动相溶剂和样品的制备成本，相比于常规的分析级LC-MS平台能够显著提高生物制药相关分析物（如肽、抗体、寡核苷酸）定量的灵敏度。