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二手LCMSMS 仪器参数10步优化技巧

2019年08月21日 15:14 来源:京科瑞达

二手LCMSMS 系统具有非常高的灵敏度、选择性、重现性,在蛋白与肽药物代谢机理及动力学研究等方面,都可快速提供稳定、可靠的结果。为了能够实现其功能,京科瑞达二手为您整理出关于二手LCMSMS 仪器参数的10步优化技巧,下面我们进入正题!

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二手LCMSMS 仪器参数10步优化技巧

 

1, CA*校准,用PPG或-己知化合物检验,如偏差不大,可以不用做质量校准,但偏高偏低要心中有数;

 

2, 先用浓度大约0.1-1 ppm的标样,通过Syringe Pump以5-10ul/min优化Compound项下面的参数,如DP、CE、EP、CXP及CAD等;

 

3, 顺序: Q1 Scan Product lon Scan +MRM ;

 

4, 不同化合物参数有可能差别很大,接通LC用FIA优化其他参数及源位置,或接一个三通,样品仍由注射泵进入离子源,同时LC保持需要的流量,优化温度和Gas1及Gas2,CXP、CAD、EP优化后通常不用再改,在保证样品充分离子化的基础上,DP低些可使母离子丰度提高,总灵敏度相应提高;

 

5, 质量范围不要太宽,涵盖待测离子再增加20-30amu即可采样时间适当长些可使噪声降低:当同时检测数上对离子时,MRM采样时间可以降全数十毫秒,而检测离子对不多时,每对离子可使用200毫秒左右;

 

6, 母、子离子输入的质量数值要选准,要根据Q1 Scan及ProductIonScan得到的结果输入,准确到0.1amu。当不能确定准确质量数时,可选待测质量数上下各0.1amu,同时数对离子进行优化,终于找出灵敏度上佳的一对离子。例如320.9-152.0、321.0-152.0、321.1-151.9...,若样品较杂,同一化合物需要选择几对母、子离子,经进样实验找出哪对有干扰,去掉,保留7不易受十扰的1~ 2对离子;

 

7, 每对离子各参数分别设,如DP, CE,Time等,对较弱离子对,采样时间可适当长些;

 

8, 手动运行Ramp进行参数优化, 各参数分别优化,Step选小此,范围不用太宽,每个参数重复优化两次,以减小偶然误差。手动优化效果比自动优化(Auto)效果好,根据LC流量和流动相组成确定温度Tem、Gas1及Gas2。当流量大,水相多时,温度及气流要大,但注意Gas2与Tem的关系。离子源喷雾位置是根据LC流量调节的,基本流量固定,位置就固定;

 

9, 喷雾电压太高有可能导致放电;

 

10, 许多参数五相影响,需要耐心地反复细调,使信噪比得以改善。

关键词: 二手LCMSMS

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