液相色谱质谱联用仪分析动物源食品中 30 种镇静剂的残留量

摘要本文介绍了一种结合使用 Captiva EMR-Lipid 与 6495 LC-MS/MS，简单、高效地检测多种动物源基质中 30 种镇静剂残留量的方法。在 0.1–200 ng/mL 的浓度范围内，所检测的 30 种镇静剂的相关系数均高于 0.99，表明该方法具有良好的线性。在猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、猪肝和牛奶基质中方法定量限为 1 μg/kg，检测限为 0.5 μg/kg，在猪肾基质中，方法定量限为 2 μg/kg，检出限为 1 μg/kg。在加标浓度为 1–10 μg/kg 时，除亚砜的回收率在不同基质中差异较大外，其余化合物的平均加标回收率和相对标准偏差分别在 60.8%–119.6% 和 0.5%–9.9% 之间，准确度和精密度良好。

前言镇静剂类药物通过抑制中枢神经系统活动而达到镇静的作用，可用于精神治疗，并在畜禽生产中用于动物高密度养殖、长途运输等，以促进动物生长或缓解运输应激[1]。然而，此类药物的滥用会导致药物残留在动物体内并发生蓄积，通过食物链进入人体后，可能对人体健康产生一系列不良副作用。GB 31650-2019[2]规定，仅允许使用治疗剂量，但在动物源性食品中不得检出；2020 年，农业农村部第 250 号公告《食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单》[3] 中明确禁止使用。现行有效的动物源性食品中镇静剂类药物残留检测标准[4-5] 涉及的药物种类仍不够全面，且前处理方法复杂繁琐。本应用选择30 种常用的镇静剂药物，使用 Captiva EMR-Lipid 高效去脂并结合高灵敏度 6495 LC-MS/MS，建立了一种准确、高效地同时检测多种动物源基质中的镇静剂类药物残留的方法。

实验部分试剂和样品标准品： 标准品和溶液配制分别取适量标准品，用甲醇分别配制得到浓度为 1 mg/mL 的单标储备液；然后取适量单标储备液，用甲醇稀释为 10 μg/mL 的混标标准工作液，储藏于 -20 °C 冰箱中备用。基质校准标样的配制：分别准确移取上述适量混标标准工作液，使用空白基质溶液稀释为浓度分别为 0.1（猪肾基质为 0.2）、0.5、1、5、50、100、200 ng/mL 的标准溶液，然后上机检测。

样品前处理称取基质样品，加入甲酸乙腈提取；经盐析分层后，取上清液加一定量水，过 Captiva EMR-Lipid 净化除脂；然后使用 AgilentPoroshell 120 EC-C18 色谱柱结合 6495 LC-MS/MS 进行测定。图 1 显示了详细的样品前处理操作流程。

质谱条件质谱： Agilent 6495 三重四极杆质谱系统离子源模式：ESI (+)干燥气温度：250 °C干燥气流速：11 L/min鞘气温度： 400 °C鞘气流速： 12 L/min雾化气压力：35 psi毛细管电压：3500 (+)扫描模式： MRM（具体参数见表 1）

结果与讨论标准曲线与线性以空白基质提取液为稀释溶剂，以目标物定量离子的响应为纵坐标，以上述基质校准标样浓度为横坐标，绘制基质标准曲线。各目标物的线性回归方程和相关系数（以牛肉举例）见表 2。从表中可以看出，在 0.1–200 ng/mL 的浓度范围内，以外标法定量，牛肉基质中所有目标化合物的标准曲线的相关系数均大于 0.99，表明该方法具有良好的线性。