应用GC/MS/MS 对橄榄样品进行农药

摘要:本文将介绍一种测定橄榄中 27 种农残的分析方法。橄榄中脂类含量高达 80% 到 85%，这会对农残的回收率和色谱系统造成不利影响。因此，本研究采用一种改进的QuEChERS 方法进行样品提取，并结合气相色谱/三重四极杆质谱 (GC/MS/MS) 的多反应监测方法进行分析。该方法在橄榄样品的回收率、重复性和重现性等方面已得到验证。结果表明，方法的定量回收率介于 70% - 120% 之间，符合 SANCO/12571 [1] 所推荐的可接受范围，RSD < 20%。方法的农残定量限与法规允许的最大残留限值相当甚至更低

前言:农残分析对于人和动物健康、进出口贸易以及法规监管来说都是十分必要的。农业生产中使用了多种农药，而且大多数农药都有相应的法规监管，如 GC/MS气质联用仪 或 LC/MS/MS 液质联用仪分析测定的食品中的最大残留限值 (MRL) [2]。气相色谱与质谱联用的分析方法以选择离子监测 (SIM) 为基础，具有相当高的灵敏度，但同时也降低潜在的识别能力和非目标物分析/回顾性分析的性能。使用 GC/MS/MS 测定食品中适用于 GC 分析的农药是近十年来兴起的一种有价值的方法，该方法具有更高的选择性和灵敏度，几乎将大部分的色谱干扰降至低甚至*消除 [3]。虽然 GC/MS/MS的灵敏度和选择性有了很大的提高，但是共萃取的基质成分还是会产生基质效应，对分析结果造成负面影响。本研究使用一种优化的样品前处理方法，可将此不利影响降至低。

材料与方法使用一种改进的 EN 萃取方法，来提取橄榄中的 27 种农残。如EN 15662 [4] 中所述，这种溶剂改进型的方法包含了非极性和极性非质子混合溶剂（乙酸乙酯：环己烷：丙酮）和极性非质子溶剂（乙腈），可用于萃取橄榄中高脂基质内的农残成分。与仅使用极性非质子溶剂 CAN 相比，使用非极性和极性非质子混合溶剂能够为可萃取化合物提供更广泛的极性范围。本文研究的农药包括有机氯、有机磷和拟除虫菊酯农药。仪器与耗材• Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒（部件号5982-5650）• Agilent Bond Elut QuEChERS 分散试剂盒，EN 方法，15 mL（部件号 5982-5156）• Agilent SPE 散装吸附剂，C18 封端（部件号 5982-8082）• Agilent J&W HP-5ms 超高惰性气相色谱柱，30 m × 0.25 mm（部件号 19091S-433UI）• Agilent 7890A GC• Agilent 7000A 三重四极杆 GC/MS 系统• Agilent 7693 自动液体进样器溶剂与农残标样• 乙酸乙酯，农残分析纯度，购自 Baker 公司• 环己烷，农残分析纯度，购自 Sharlau 公司• 丙酮，农残分析纯度，购自 Baker 公司• 混合溶剂∶乙酸乙酯∶环己烷∶丙酮 (1∶1∶4)• 农残标样，购自 Dr. Ehrenstorfer

气相色谱条件载气： 恒压，22.0 psi柱温： 初始温度 70 °C (2 min)，25 °C/min 升至 150 °C(0 min)，3 °C/min 升至 200 °C (0 min)，8 °C/min升至 280 °C (10 min)进样器温度： 250 °C隔垫吹扫： 开启，3 mL/min分流出口吹扫流速： 100 mL/min（0.75 min 时）进样： 不分流进样，1.0 µLRTL 化合物： 甲基毒死蜱质谱条件离子源： EPC离子源温度： 280 °C碰撞气体： 氦气淬灭气体，开启，2.35 mL/min氮气碰撞气体，开启，1.5 mL/min传输线温度： 280 °CMS 四极杆 1,2 温度： 两者均为 150 °CMS1/MS2 分辨率： 宽/宽MRM 设置： 见表 1

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样品前处理橄榄摘自当地橄榄树。将橄榄切成薄片，称量部分（约 1 g）用于分析，剩余的冷冻保存。如果有橄榄核，将其剔除，并计算最终样品中橄榄核的百分含量。这是一项关于 LMR 计算的法规要求。取有代表性的橄榄样品（2 或 3 整片）对橄榄核比重进行估算，方法如下：首先，称取含有橄榄核的代表性样品。然后，剔除橄榄核并称量。最后，根据公式 1 计算橄榄核的百分含量。

结果与讨论所有目标农残均在 HP-5ms 超高惰性气相色谱柱上实现了分离和检测。由于 LC/MS/MS 具有强大的选择性，空白基质的 MRM 色谱图中未显示目标分析物的干扰峰。图 1 所示为经改进的 EN QuEChERS 方法制备的 20 µg/kg 加标橄榄提取液的GC/MS/MS 谱图。图 2 表明橄榄和橄榄油分析中具有挑战性的农药（如特丁津和毒死蜱）的定量分析结果十分优异。