LC/MS/MS液质联用仪测定牛肉中的氨苯砜

前言：本文使用简单易用的 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取技术对牛肉样品进行前处理，然后采用结合 Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统的 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱进行高效分离和高灵敏度检测，实现 ppb 级浓度的氨苯砜分析。

样品前处理首先对样品进行预处理，称取 2 g 磨碎的牛肉置于 50 mL 离心管，添加 10 mL 乙腈。将离心管强力涡旋 2 min。试管中加入正己烷(5 mL)，涡旋 1 min。然后，将试管在 4 °C 下以 5000 rpm 的速度离心 5 min。丢弃所有上清液。将乙腈层转移至另一试管，添加10 mL 浓度为1 M 的盐酸水溶液。然后将试管涡旋 1 min，用于固相萃取。图 1为样品提取步骤。先后采用 3 mL甲醇和 3 mL水预处理 AgilentBond Elut Plexa PCX 小柱（60 mg，3 mL，部件号 12108603）。提取物（相当于 2 g 样品）以 1 mL/min 的速度通过小柱。当样品全部通过小柱后，用 5 mL 0.1 mol/L 盐酸水溶液和 5 mL 甲醇淋洗小柱。小柱在负压（低于 2.0 kPa）下干燥 5 min。使用 5 mL25% 氢氧化铵的乙腈溶液对样品进行洗脱。收集洗脱液并在 40 °C以下使用氮气吹干。用 15 % 甲醇水溶液 (v:v) 溶解样品残渣并定容到 1.0 mL，经 0.2 µm 滤膜过滤，然后采用 LC/MS/MS 进行分析。

结果与讨论：

线性和检测限将混合工作溶液加标至空白基质中，制得用于创建外标校准曲线的溶液（0.25 µg/kg、0.5 µg/kg、1 µg/kg、2 µg/kg 和 5 µg/kg）。牛肉经过整个流程（包括预处理和 SPE 步骤），得到空白基质。将各种化合物信噪比高于 3:1 时的浓度作为检测限 (LOD)。校准曲线和 LOD 的结果列在表 2 中。

回收率与重现性测定高低不同浓度级别氨苯砜的回收率（表 3）。通过比较 SPE提取前加标样品的 MRM 峰面积和 SPE 提取后的加标样品（后加标）MRM 峰面积计算回收率。图 2 所示为低浓度氨苯砜加标于空白牛肉样品分析所得的色谱图。图 3 为空白样品。

结论：使用 Agilent Bond Elut Plexa PCX SPE 分析牛肉中的氨苯砜具有良好的回收率和重现性。Bond Elut Plexa SPE 联用 LC/MS/MS分析，可实现肉类样品中 ppb 级浓度以下氨苯砜的高灵敏度定量分析。