LC/MS/MS 测定牛骨骼肌中的氨苯砜

前言：本文使用针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒，采用 QuEChERS 方法对牛骨骼肌进行前处理，然后采用 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱进行高效分离，并采用Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统对样品中亚 ppb 级浓度水平的氨苯砜进行高灵敏度检测。材料与方法样品前处理针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包（部件号 G7750-10001）针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散固相萃取，15 mL 萃取管（部件号 5982-4980）HPLC 条件色谱柱： Agilent Poroshell 120 SB-C18, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 685775-902）洗脱液： A）0.1 % 甲酸水溶液；B）乙腈进样量： 10 µL流速： 0.3 mL/min梯度： %B，在 8 分钟内线性升至 80% B温度： 室温样品瓶： 安捷伦认证样品瓶（部件号 5183-2072）系统： Agilent 1260 Infinity 液相色谱仪

质谱条件电离模式： ESI + 安捷伦喷射离子流聚焦气体温度： 325 °C气体流速： 10 L/min雾化器压力： 50 psi鞘气温度： 400 °C鞘气流速： 12 L/min毛细管电压： 4500 V (ESI+)喷嘴电压： 0 V (ESI+)系统： Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统

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样品前处理样品粉粹将牛骨骼肌切成小块，置于洁净的塑料袋中，并在 –20 °C 下冷冻过夜。第二天只取需用量的冷冻骨骼肌，并充分混匀。将样品*粉碎，制得均质样品。确保所得的最终样品中无明显可见的肉块。萃取/分离取 5 g (± 0.1 g) 均质样品于 50 mL 离心管中。采用 20 µL QC 加标溶液制备 QC 样品。向除了对照空白外的其他所有样品中加入内标加标溶液 (100 µL)。盖上离心管，涡旋振荡 1 min。用分液器向每个离心管中加入 10 mL 水。盖上离心管，涡旋振荡 1 min。然后用分液器向每个离心管中加入 15 mL 乙腈。向每个离心管中直接加入针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包。盖紧离心管，手动剧烈振摇 20 s，确保溶剂与所有样品充分混合，结晶聚集物*打碎。将样品离心管以 4000 rpm 的转速离心 5 min。

分散固相萃取的净化从离心管中吸取 8 mL 乙腈上清液，移至 15 mL Agilent Bond ElutQuEChERS 兽药分散 SPE 管。将离心管盖紧，涡旋振荡 1 min。然后用标准离心机将离心管以 4000 rpm 的转速离心 5 min。取5 mL萃取液，转移至试管中，并在低于 40 °C 的温度下于氮气环境中干燥。最终残留物用乙腈:水 (1:9) 溶解并定容至 1 mL。然后将残留物通过 0.2 µm 滤膜（部件号 5190-5106）过滤并用 LC/MS/MS分析。

结论使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 分析牛骨骼肌中的氨苯砜获得了良好的回收率和重现性。Bond Elut QuEChERS 联用LC/MS/MS 分析，可实现肉类样品中亚 ppb 浓度氨苯砜的高灵敏度定量分析。