峰展宽？峰分叉？可能与溶剂效应有关！应对思路供您参考！

《中国药典》2020年版实施已达10个月，中药配方颗粒*160个国家标准发布已有半年以上，岛津技术人员在走访客户时发现，多位客户反馈在多个项目（2341通则禁用农药残留量检测、2351通则液质联用法扩项、配方颗粒特征图谱重现）上进行方法重现时遇到“峰展宽”或者“峰分叉”现象。

“峰展宽”或者“峰分叉”一般与“溶剂效应”有较大关联，原因在于样品（对照品和供试品溶液在制备时）溶剂的洗脱强度强于流动相强度，强洗脱溶剂不均衡地参与了目标物的洗脱，使色谱峰保留时间整体提前，而样品在柱前的不充分扩散导致了峰形扭曲。

这种影响轻则导致峰展宽，严重时甚至导致峰分叉，给定性定量带来影响，结合岛津技术人员所做案例，以下应对思路供广大客户参考。

应对思路及案例

使用流动相、初始比例流动相或洗脱强度尽量低的液体作为样品溶剂，应注意使用该溶剂应不影响待测物的溶解性。

乌梅配方颗粒对照品参照物溶液不同溶解溶剂对比图

使用较弱洗脱强度的溶剂稀释样品，应注意使用该溶剂应不影响待测物的溶解性。

如《中国药典》2020年版四部“2341第五法药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法”LC-MS/MS法上样前加水是很好的方式。

降低进样体积，但需要注意此方法可能会降低灵敏度，对于痕量分析可能影响定量。

赤芍配方颗粒特征图谱项目中对照品参照物溶液测试：没食子酸对照品、原儿茶醛对照品、儿茶素对照品、芍药苷对照品。

增加柱前管路体积，一般使用更粗的管路比更长的管路有效。

使用co-injection功能

co-injection功能原理

co-injection使用方法

使用技巧：为获取更好效果，纯化水吸取量一般为进样体积3-5倍。

co-injection在药典和配方颗粒项目分析检验中的应用

1、禁用农药残留量检测：LC-MS/MS方法，进样体积为2μL，纯化水吸取量10μL。

2、真菌毒素检测：2351通则第六法呕吐毒素项，进样体积为5μL，纯化水吸取量20μL。

3、配方颗粒应用：赤芍配方颗粒特征图谱项目（对照品参照物溶液），进样体积为10μL，纯化水吸取量30μL。

以上三个项目案例可以看到，通过在线稀释进样，峰形改善，同时灵敏度有提升！

应对思路总结