气相色谱和三重四极杆气质联用系统对牛奶中的多残留农药进行定量限的研究

前言 为确保牛奶和乳制品的安全性，一些国家/地区颁布了一系列限制农药残留的法规。 为满足这些限制要求，法规中规定了参考方法。在政府法规中，牛奶的最大允许农 药残留量远低于水果和蔬菜中的残留*[1]。对于这些低浓度物质，需要使用先进 的分析平台才能达到所需的高灵敏度。本应用简报介绍了两种 GC/MS/MS 平台： Agilent 7890B/7000C 和 8890/7010B 三重四极杆 GC/MS 系统。两套系统均适用于 牛奶中的农药分析和各自相应的线性范围。结果表明，8890/7010B 系统可为约 60% 的农药提供低至 1 ng/mL 的检测，而 7890B/7000C 系统则可为 10% 的农药提供低 至 1 ng/mL 的检测。

实验部分 化学品与试剂 所有试剂和溶剂均为 HPLC 或分析纯级。 乙腈 (ACN) 购自 Honeywell (Muskegon, MI, USA)。农药标准品购自阿尔塔科技 有限公司（中国天津）。将溶于乙腈的 农药单标储备液 (100 µg/mL) 储存在 –20 °C 下，然后用乙腈配制混合标准溶 液 (1 µg/mL)，并储存在 –20 °C 下。

牛奶样品前处理和校准标样配制 按照应用简报“使用 Agilent Captiva EMR-Lipid 与 LC/MS/MS 和 GC/MS/MS 对 牛奶中的多类别多残留农药进行分析”[2] 中的方法处理样品。详细步骤如下：将 5 mL 牛奶转移至 50 mL 离心管中。在 每个离心管中加入两粒陶瓷均质子、 10 mL 乙腈和 Agilent QuEChERS 萃取 试剂盒（部件号 5982-5650）。使用 Geno/Grinder 在 1000 rpm 下将样品机械 振荡 5 分钟，然后在 10 °C 下以 4000 rpm 的转速离心 5 分钟。吸取 4.8 mL 提取物 转移至新试管中，并加入 1.2 mL 水轻轻 混合。然后将样品混合物上样至 Agilent Captiva EMR-Lipid 6 mL 过滤柱。重力自 流结束后，将 1.5 mL 溶剂洗脱液 (80/20 ACN/H2O) 加入 Captiva EMR-Lipid 中， 同样使其重力自流。将 5 mL 洗脱物转移 至新的 15 mL 离心管中，然后加入 3.5 g无水 MgSO4（EMR 干燥盐包，部件号 5982-0102）除水。将样品强力涡旋 3 分 钟，然后以 8000 rpm 的转速离心 5 分 钟。将样品提取物转移至标记的自动进样 器样品瓶中进行 GC/MS/MS 分析。 在空白基质中加入农药校准标样以制备基 质匹配校准标样。空白基质来自其中一 种牛奶样品，该样品中不含预筛查中检 测到的农药。各校准溶液对应牛奶中加 标浓度为 1、2、5、10、20、50、100、 200 和 500 ng/mL。由于整个样品前处理 工作流程对用于 GC/MS/MS 分析的原始 样品浓度引入了 2.5 倍稀释，因此自动进 样器样品瓶上标记的校准溶液最终浓度分 别为 0.4、0.8、2、4、8、20、40、80 和 200 ng/mL。为保持一致性，本研究中提 到的浓度是指样品前处理前的加标浓度。

仪器条件 使用两种 GC/MS/MS 平台对牛奶中的农 药进行了分析。其中，7890B/7000C 系 统配备 Extractor EI 离子源，具有惰性 和较宽的线性范围。8890/7010B 系统 配备高效离子源 (HES)，离子化效率是 Extractor 离子源的 20 倍，即使在超痕量 水平下也能实现可靠分析[3]。使用 Agilent MassHunter 农药与环境污染物 MRM 数 据库自动、便捷地创建采集方法，包括 MRM 离子对、碰撞能量和进样口压力等 操作条件。测试中还使用了保留时间锁 定 (RTL) 功能，确保不同仪器之间的保留 时间一致性，并使之与数据库保持一致。 GC/MS/MS 仪器条件如表 1 所示。

结果与讨论 表 2 列出了 7890B/7000C 和 8890/7010B 系统的线性范围和 R2 值。线性范围为 1–500 ng/mL，在两套系统上均进行了验 证。此线性范围适用于大多数分析物，但 某些分析物由于在 GC/MS/MS 系统上的 响应能力较低，浓度对其并不适用。 例如，双苯氟脲在 7010B 系统上的线性

范围为 5–500 ng/mL，而在 7000C 系统 上的线性范围为 50–500 ng/mL。氯虫 苯甲酰胺在 7010B 系统上的线性范围为 10–500 ng/mL，而在 7000C 系统上的线 性范围为 50–500 ng/mL。两种系统都能 满足检测要求，其中 7010B 系统的检测能 力远远超出了一些法规的要求。各化合物 的线性范围详情如表 2 所示。图 1 展示了 通过 7890B/7000C 和 8890/7010B 三重四极杆系统获得的定量限。定量 限是指仪器线性范围内的标准浓度。 对于大多数农药而言，与 7890B/7000C 系统相比，8890/7010B 系统的定 量限要低得多。理论上，配备 HES 的 7010B 系统产生的离子是配备 Extractor 离子源的 7000C 系统的 20 倍，在超痕量 水平下也能实现可靠分析。但实际上，灵 敏度受到多种因素的影响，尤其是化合物 本身。