液质使用经验

             液质使用经验

                  检硕科学上海科技有限公司

经验总结一：液质使用经验与禁忌

1、酸性物质适合做负离子检测，所以流动相偏碱性较合适，促使其解离，碱性物质适合做正离子检测，流动相中适当的加入酸，促使其形成正离子，流动相中适当加一些醋酸钠（或者醋酸铵），可形成加钠的正离子或加铵的正离子。

液质分析中推荐使用的流动相和添加剂

推荐使用 不使用/尽量不使用

有机溶剂 反相：乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、二氯甲烷正相：吐仑、己烷、苯、环己烷、四氯化碳 四氢呋喃

缓冲液 乙酸铵、甲酸铵 磷酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐

酸 乙酸、甲酸、三氟yi酸（正离子） 硫酸、高氯酸、磷酸、盐酸、磺酸

碱 氨水 季铵、强碱、三乙胺

其它

清洁剂、表面活性剂、离子对试剂、不挥发盐

2、糖苷类的物质在做FAB和ESI+时，[M+Na]峰往往比[M+H]峰要强，此为经验，原因只是推测可能和天然产物的提取过程有关；盐类化合物如盐酸盐、硫酸盐在质谱中酸的部分一般不会出现；二羧酸盐（esi负离子模式）除了分子离子峰外，会出现连续掉44的两个峰，为失去羧酸根的离子，这三个峰非常特征，但是会受锥孔电压的影响，调低电压谱图会更漂亮。

3、胺类物质做ESI质谱时要注意进样量要少，因为很容易离子化，不易冲洗干净，会影响后面样品的测定。像三乙胺在液质联用时不能用于调节流动相pH值。若不慎引入三乙胺，在正离子检测时总会出现很强的102峰（三乙胺的[M+H]）。

4、质谱用水一般用娃哈哈纯净水之类的就很好；质谱用甲醇和乙腈，换用了很多品牌，发现Merck的还是稍微好一些；Finnigan用的氮气不一定要用到液氮瓶，用普通的钢瓶气就可以了，可能还省钱些；建议大家买一个好一点的手电筒和一个放大镜，手电筒用来看源里面，放大镜看你割的毛细管平整。

5、质谱的基线其实跟液相的紫外检测器和荧光检测器一样，基线高的原因不外乎内部和外部的原因。

1）你选择的流动相在质谱的响应比较高，比如水相比较多的时候，噪音比较大些；还有如果盐含量比较大的时候，噪音更大些。

2）检测器的灵敏度越高的时候，噪音应该越高。如果质谱的污染比较严重时，基线肯定比较高。比如离子阱检测器，用得久了，阱中的离子就会增多，一方面降低了质谱的灵敏度，另一方面增加了基线噪音。

3）质谱的基线很多时候还跟你选择的离子宽度有关。比如你作选择离子扫描的时候，基线就低些。你作选择反应扫描的时候，离子宽度不要选得太宽，太宽噪音就高些。

4）多级质谱一般做二级或三级质谱，基线噪音就低很多。

6、质谱维护经验交流：做样前－检查氮气，流动相，质谱仪的真空度，毛细管温度…

1） 最好不用直接进样（容易污染离子源）；

2） 做联用时最好分流（a可以使用常规柱，b缩短分析时间，c 延长质量分析器寿命）；

3） 最好使用在线切换阀，降前每个样品的前后1－2分钟的流动相切入废液（避免样品中的盐进入质谱，做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液）；

4）开始联用前，直接运行质谱数分钟，可以先将温度（毛细管温度和离子源温度（APCI））加热到预设定值（如果是APCI源还可以避免将烧掉heater，太贵了，最好别烧）；

5） 待机时将切换阀置于waste，避免刚开液相时将流动相打入离子源；

　6） 关机前毛细管的温度先降下来，稳定一段时间后再关闭电源，避免风扇停止转动后毛细管外围的热量向里扩散，容易引起内部线路及电子元器件老化加速；

7） 每天清理毛细管口外部，擦洗干净，每次停机时注意清洗Skimmer，用无尘擦拭纸，kimberly那种；

8）如果用的是钢瓶而且天天做样的话，将两个钢瓶并联，当然，一月不做一次的话就算了；

9） 做定量时注意离子源喷针的具体位置，否则标准曲线就不能用了；

10）不要不经过柱子分离进行定量分析，结果不可靠（竞争性抑制目标分子离子化）；

11）如果是负离子检测的话，可以相流动相中加入少量异丙醇；

　12） 不要使用不挥发性盐，如果使用挥发性盐，但浓度不要超过20mmol/L；

　13） 需要使用酸的情况下可以用甲酸，乙酸，三氟yi酸可以用，但能用甲酸或乙酸时就别用TFA；

　7、理论上液质联用禁止使用任何不挥发性的缓冲盐，如果需要尽量使用诸如乙酸氨等挥发性盐，浓度不要超过20mmol/L.

　对于不挥发性的缓冲盐，如果你的仪器有吹扫捕集的话也可使用，但一定要小心。万不得已也不要用，首先有不挥发盐是得不到好的离子流的，其次盐留在质谱中很难除掉，除非停机清洗，不然一直会影响其他样品的分析。

　可以找质谱友好的条件来做液质联机，例如色谱条件为20mM磷酸盐的水/乙腈流动相，做液质联机的时候就可以用醋酸铵代替，然后用醋酸调节pH值与磷酸盐的一致即可。

除了难挥发的盐，三乙胺、表面活性剂、还有高浓度（>0.5%）的TFA，都对质谱不好，液质联用的流动相中应该避免。

                                                                                                                           本篇转至实验之家