GC-MS/MS法一针测定植物性食品中 208种农残及代谢物

前言：中国是农药生产和使用大国，农药广泛用于农业生产中，同时农药滥用和不 规范使用现象比较普遍，所以在食品中农药残留情况也是比较突出。日常检 测中，农残检测的任务也相当繁重，当前我国对于农残检测的方法标准主要 集中在GC、GCMS等，随着气相色谱三重四极杆质谱的普及，GC-MS/MS 的检测方法以其高选择性、高灵敏度、高通量特点越来越受检测工作者的欢 迎，为此农业部在2017年发布了《食品安全国家标准 植物源性食品中208种 农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（征求意见稿）。赛 默飞应用团队基于此国标方法，开发了应对不同基质中农残前处理方式，以 及配套的仪器方法和数据处理方法，以满足农残检测快速、准确、高通量的 要求。

中国是农药生产和使用大国，农药广泛用于农业生产中，同时农药滥用和不 规范使用现象比较普遍，所以在食品中农药残留情况也是比较突出。日常检 测中，农残检测的任务也相当繁重，当前我国对于农残检测的方法标准主要 集中在GC、GCMS等，随着气相色谱三重四极杆质谱的普及，GC-MS/MS 的检测方法以其高选择性、高灵敏度、高通量特点越来越受检测工作者的欢 迎，为此农业部在2017年发布了《食品安全国家标准 植物源性食品中208种 农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（征求意见稿）。赛 默飞应用团队基于此国标方法，开发了应对不同基质中农残前处理方式，以 及配套的仪器方法和数据处理方法，以满足农残检测快速、准确、高通量的 要求。

 2、仪器：气相色谱-三重四极杆质谱仪TSQ 9000 (赛默飞世尔科 技，美国)，Pesticides II 30 m×0.25 mm×0.25 µm with 5 m guard（PN：26RD142F）毛细管色谱柱。

 3. 主要试剂和材料：3.1 乙腈（色谱纯） 3.2 正己烷（色谱纯） 3.3 冰醋酸（分析纯） 3.4 酸化乙腈（1:99）：取10 mL冰醋酸（3.3）加入到 990 mL乙腈（3.1）中，混匀 3.5 正己烷饱和的乙腈：取500 mL乙腈（3.1），往里加 入正己烷（3.2），直到有明显分层 3.6 QuEChERS盐包1（PN：60105-333-P）：含4 g硫 酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠 3.7 QuEChERS盐包2（PN：60105-335-P）：含6 g无 水硫酸镁、1.5 g醋酸钠 3.8 QuEChERS净化管1（PN:60105-218-P）：内含 900 mg硫酸镁、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL 塑料离心管 3.9 QuEChERS净化管2（PN：60105-226）：内含 1200 mg硫酸镁、400 mg PSA、400 mg C18及400 mg GCB 的15 mL塑料离心管 3.10 QuEChERS净化管3（PN：60105-225-P）：内含 1200 mg硫酸镁、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL 塑料离心管

 4 实验部分 4.1 QuEChERS前处理方法 根据不同的样品基质类型，前处理有如下四种基本流程： 4.1.1 上海青（适用于蔬菜、水果和食用菌类） 称取10 g已均质好的试样（精确至0.01 g）于50 mL塑 料离心管中，加入10mL乙腈（3.1），充分混匀后， 放入-20℃冰箱冷冻10 min，再加入4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠等盐包 （PN：60105-333-P），盖上离心管盖，剧烈震荡1 min 后，9000 r/min离心6 min。吸取6 mL上清液到内含900 mg 硫酸镁、150 mg PSA及15 mg GCB的15 mL塑料离心管 中（PN: 60105-218-P）,涡旋混匀1 min, 9000 r/min离心 6 min，吸取1 mL上清液于进样瓶中，待上机测定。 4.1.2 大米（适用于谷物、油料和坚果类） 称取5 g已粉碎的试样（精确至0.01 g）于50 mL塑料离 心管中，加10 mL水涡旋混匀，静置30 min。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4），充分混匀后，放入-20℃冰箱 冷冻10 min，再加入6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠等盐包 （PN：60105-335-P），盖上离心管盖，剧烈震荡1 min后 9000 r/min离心6 min。吸取6 mL上清液加到内含1200 mg 硫酸镁、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料离心管中 （PN：60105-225-P），涡旋混匀1 min。9000 r/min离心 6 min，吸取1 mL上清液于进样瓶中，待上机测定。 4.1.3 普洱茶（适用于茶叶和香辛料类） 称取2 g已粉碎的试样（精确至0.01 g）于50 mL塑料离 心管中，加10 mL水涡旋混匀，静置30 min。加入10 mL 1%醋酸乙腈溶液（3.4），充分混匀后，放入-20℃冰 箱冷冻10 min，再加入6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠等盐 包（PN：60105-335-P），盖上离心管盖，剧烈震荡 1 min后9000 r/min离心6 min。吸取6 mL上清液加到内含 1200 mg硫酸镁、400 mg PSA、400 mg C18及400 mg GCB的15 mL塑料离心管中（PN：60105-226），涡旋混 匀1 min。9000 r/min离心6 min，吸取1 mL上清液于进样瓶 中，待上机测定。 4.1.4 花生油（适用于食用油类） 称取2 g试样（精确至0.01 g）于50 mL塑料离心管中， 加入10 mL正己烷饱和的乙腈（3.5），剧烈震荡1 min后 9000 r/min离心6 min。吸取乙腈层加到内含1200 mg硫 酸镁、400 mg PSA及400 mg C18的15 mL塑料离心管中 （PN：60105-225-P），涡旋混匀1 min。9000 r/min离心 6 min，吸取1 mL上清液于进样瓶中，待上机测定。

 4.2. 样品基质溶液： 选取空白样品，用（4.1）前处理方式得到的空白基质溶 液。

4.3. 标准溶液的配置 7.1 标准储备液：在十万分之一分析天平上称取每种农 药单标化合物10 mg，加入10 mL相应的溶剂（根 据不同的化合物加入丙酮、甲苯或者乙腈）溶解， 配制成浓度为约1000 mg/L 的溶液。每种单个标准 储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得 到。所有单标储备液在-20℃冰箱中冷冻保存。单标 储备液的有效期为6 个月。 7.2 混合标准中间液：移取适量的单标储备液，用乙腈 稀释。中间标准储备液的浓度为10.0 mg/mL。中间 标准储备液在-20 ℃冰箱中冷冻保存。中间储备液的 有效期为3 个月。 7.3 工作标准溶液：取适量的混合标准中间液，以空白 样品基质液（6）依次稀释成浓度为0.010, 0.020, 0.050, 0.100, 0.200 mg/L的工作标准溶液。

 4.4 仪器方法 4.4.1气相方法： 柱温箱：40 ℃保持1.5 min，以25 ℃/min升至90 ℃，保 持1.5 min，再以25 ℃/min升至180 ℃，保持1.5 min，以 5 ℃/min升至 280 ℃，最后以 10 ℃ /min 升温到 300 ℃， 保持 5 min；SSL进样口：温度270 ℃，进样模式：不分流 进样，不分流时间：1 min；载气：恒流，1.2 mL/min. 4.4.2质谱方法： 传输线温度：280 ℃；离子源温度为300 ℃；离子 源：E I；采集方式：Time-SRM；分辨率：F W H M 0.7Da(Q1和Q3)；化合物离子对信息来源于Thermo农残数 据库CDB以及AutoSRM。 4.5 数据处理 使用 Thermo Scientific™ TraceFinder软件对数据进行采 集、处理和报告分析，该软件可同时实现仪器控制、方法 开发、定量/ 定性分析以及报告编辑。此外，TraceFinder 软件可以根据你所需要的信息自定义报告模板。

4.6 AutoSRM自动优化化合物离子对信息及碰撞能量 对于串接气质来说，方法优化及建立是非常重要的部分。常规的方法开发需要对每个未知化合物挑选母离子，子离 子以及优化碰撞能量，当未知化合物越多，花费的时间也 就越多。赛默飞世尔科技全新一代三重四极杆气相色谱质 谱联用仪TSQ 9000有的AutoSRM功能，可以自动优化 离子对信息及碰撞能量，并且当一次优化的化合物数目较 多时，可以智能的调整进样的次数以期在最少的时间内得 到*化的方法，使得整个方法建立部分更加简单方便。 整个AutoSRM的步骤如下： 第一步：选择母离子，进行全扫描（full scan）进样，找 到对应化合物的色谱峰，挑选质量数较大，离子丰度高的 特征离子作为母离子。

 结论：本实验采用QuEChERS前处理方案，Thermo Fisher全新 一代三重四极杆质谱TSQ 9000，同时配备Pesticide II色谱 柱分离，在Time-SRM的扫描方式下，让仪器方法管理更 加智能方便，使208种农药及代谢物在36min内一针完成 分析，基于TraceFinder软件一站式的数据处理，一站式完 成208种农残的全流程分析检测。该实验室方案具有前处 理流程简单、快速、准确、有效，仪器操作简便，方法性 能具有出色的灵敏度和出色的稳定性的特点，*新 国标对于农残检测的要求。