使用三重四极杆液质联用系统对猪肉和鸡蛋中的兽药进行多类别残留分析

前言：主要成分为抗菌剂和激素的兽药已广泛用于疾病防治、促进生长和提高饲料转化率。动物源性产品中，能够引发过敏反应和抗生素耐药性的兽药残留已成为消费者在购买产品时关注的问题。为保护公共健康，US FDA 于 2015 年 6 月通过兽药饲料指令颁布了管控抗微生物药物使用的终规定1 。欧盟法规请参见立法提案 2014/0257(COD)2 ，该法规将废止并替代指令 2001/82/EC。新法规旨在达成影响评估所确定的目标，并解决抗生素耐药性带来的公共健康风险问题。在中国，为设定动物源食品中兽药含量的大限值3 ，农业部发布了第 235 号公告3 。根据分析物和基质的不同，实现准确定量要求的范围为 ppt 至 ppb 级。基质的复杂性加上不同类别兽药的特性（如不同 pH 条件下的疏水性和稳定性），导致难以在一次运行中检测多个类别的分析物。常用标准方法可涵盖一个类别或一小组相似类别的兽药。为有效监测兽药并保护公共健康，迫切需要能够在一次运行中检测多个类别的分析物。 Agilent Ultivo 三重四极杆液质联用系统十分符合这一要求。Ultivo 专门设计用于解决以环境和食品安全领域为代表的常规生产实验室所面临的许多挑战。该系统融入了多项革命性创新，体积远小于上一代三重四极杆系统，但性能丝毫不打折扣。双六极杆设计使系统拥有离子传输效率。硬件和电子元件方面的提升使极性切换速度更快。此外，Ultivo 减少了用户对系统维护的干预，使非专业质谱用户也能够通过 VacShield 真空盾和可拆卸检测器从容应对系统运行和维护。

本应用简报展示了一种分析筛查方法，能够将 Ultivo 三重四极杆液质系统与 Agilent 1290 Infinity II UHPLC 联用，分析猪肉和鸡蛋中 27 个类别的 151 种兽药。我们还证明了 Agilent EMR-Lipid 样品前处理试剂盒具有广泛的应用范围。EMRLipid 能够有效去除动物源基质中的高脂成分，并提供优异的兽药回收率

实验部分：标准品和试剂兽药标准品购自 Dr. Ehrenstorfer GmbH、WITEGA laboratorien Berlin-Adlershof GmbH、Toronto Research Chemicals (TRC) 或 AccuStandard, Inc。表 1 列出了该溶液中含有的 151 种化合物。在流动相配制中使用超纯水（> 18.2 MΩ，Milli-Q 水系统）、乙腈（LC-MS 级，Fluka）和甲酸（98% 左右，质谱用，Fluka）。在样品前处理中使用乙腈（HPLC 级，SigmaAldrich）、二甲基亚砜（DMSO，> 99.9%，Aldrich）、乙酸铵（≥ 98%，Sigma-Aldrich）和甲酸（98% 左右，HPLC 级， Fluka）。

图 1 所示为实验获得的阿苯达唑、倍氯米松、氯霉素、四环素、竹桃霉素、依诺沙星、磺胺氯哒嗪和克仑特罗八个不同化学类别的八种化合物的校准曲线。

Ultivo 表现出*的分析灵敏度。多数化合物都可以在基质加标浓度为 2 ng/g 的条件下检出。例如，鸡蛋样品中有 93% 的化合物能够以信噪比 (S/N) 大于 10 的水平检出，对定性离子和定量离子均是如此。图 2 是加标浓度为 2 ng/g 的鸡蛋样品的样品色谱图。

图 3 所示为不同基质浓度条件下定性离子和定量离子 S/N > 10 的化合物所占的比例。

方法精度通过七次重复测定对方法在加标浓度 5 ng/g 条件下的重现性进行研究。图 4 所示为猪肉和鸡蛋样品加标浓度为 5 µg/kg 时分布比例的 %RSD (n = 7)。结果表明 %RSD 小于 20% 的化合物占 92%，重现性良好。

结论：本研究开发了一种能够分析猪肉和鸡蛋中 27 个类别的 151 种兽药的便捷分析方法。分析灵敏度、准确度和精度结果证明，Agilent Ultivo 三重四极杆液质联用是兽药分析的可行解决方案。