赛默飞GC-MS/MS测定动物饲料中极低含量的 PCDD/Fs

研究简介：随着近年来气相色谱 - 三重四极杆质谱 （GC-MS/MS） 联用技术的不断 发展，欧盟 644/2017 和 771/2017 法规允许使用 GC-MS/MS 对食品和 饲料中的多氯代二噁英 （PCDDs）、多氯代呋喃 （PCDFs）、二噁英 类多氯联苯（dl-PCBs）等化合物进行确证分析，并控制其“高水平 （Maximum levels, MLs）”和“干预水平（Action levels, ALs）”。1,2 气相色谱 - 高分辨率质谱 （GC-HRMS）因其高分辨率和高灵敏度，得 以从各种复杂基质干扰中分离出这些强毒性的二噁英化合物。相比而言， 三重四极杆气质联用仪 （GC-MS/MS） 的特点则在于其高选择性是通 过“母离子—子离子”组成的特征离子对来实现的，GC-MS/MS 能够获 取基本不含基质干扰的总离子流图 （TICs）自欧盟法规在 2014 年允许使用 GC-MS/MS 分析二噁英 以来，1 灵敏度往往成为显示 GC-MS/MS 在实现可靠（并 符合监管要求）的二噁英及二噁英类物质确证分析的重 要性能指标。除灵敏度外，常规分析中评价仪器性能还 需要考虑其他因素，如：样品质量、溶剂体积、和进样 量等，这些因素也将方法 （和系统）在常规环境分析中 的适用性。 在本研究中，我们评估了配备新型 AEI 离子源的 TSQ 9000 三重四极杆 GC-MS/MS 系统分析溶剂标样和实际 食品 / 饲料样品中 PCDD/Fs 的性能。本方法以 EU 法规 规定的 1/5 的“高水平（MLs）”为定量限（LOQs）， 充分显示其能满足常规分析中所需的灵敏度、选择性和 稳定性。

 实验方法：及操作 实验样品 动物饲料样品、质控样品和空白样由列日大学（ University of Liege）提供。表 1 列出了样品类型、质量和所允许的 大浓度 （ML） 4 。仪器性能测试、标准曲线和定量使用 EN:1948 的标准溶液 （加拿大惠灵顿实验室公司） 进行 分析。

样品萃取 样品制备按照此前文献描述的提取和净化方法进行。 采用加速溶剂萃取技术结合离线多层酸性硅胶柱、 PowerPrepTM 自动化系统 （FMS 公司） 和三段柱（多 层 ABN 硅胶、 碱性氧化铝、活性炭）的净化方法进行 样品前处理，样品终定容在 10 µL 壬烷中。 本实验使用的 GC-MS/MS 系统为配备 Thermo ScientificTM TRACETM1310 气相的 TSQ 9000 三重四极 杆质谱仪。液体样品通过具有触底进样功能的 Thermo ScientificTM TriPlusTM RSH 自动进样器进样分析。用全 氟三丁胺（PFTBA） 对质谱仪进行自动调谐和校正。 质谱仪在选择反应监测 （SRM） 模式下运行，通过 AutoSRM 软件对标记的和未标记 PCDD/F 进行离子对 和碰撞能的优化。相关的气相和质谱条件详见表 2 和附 录 A。数据的采集、处理和报告使用 Thermo ScientificTM ChromeleonTM （CDS） 变色龙软件进行。

 方法中分配给待测化合物的驻留时间长于同位素内标（进 样内标和回收率标）。这是因为同位素标记的化合物在样 品中通常的添加量比待测化合物高很多。本研究中，通过 驻留时间优先分配，在确保内标物有足够的扫描时间的同 时 ，使目标物分析拥有高的灵敏度。 所 有 GC-MS/MS 和 GC-HRMS 的 对 比 实 验， 都 是 基 于 TSQ 9000 GC-MS/MS 上 2 µL SSL 进样与 WatersTM Autospec PremierTM （Milford，USA）上 5 µL PTV 进样的 结果进行的。

 结果与讨论 色谱分析 TraceGOLD TG-Dioxin 色谱柱能完美分离 TCDD/F （图 1） ，并为 PeCDD/F 的同分异构体实现了符合现行 EU 标准的色谱分离 （图 2）。

 灵敏度 仪器检测限 （IDLs） 通常可以用两种方法来确定 : 通过计 算信噪比，或用一系列重复进样的数据来进行统计学分析。 在 GC-MS/MS 分析中，背景噪音通常很小，因此会使用 第二种计算方式。图 3 显示了在 TSQ 9000 GC-MS/MS 系 统中通过对2，3，7，8-TCDD 溶剂标样进行重复进样（n=8） 得到的 IDL 表现，标样进样浓度相当于 柱上 5 fg。

然而，在实际样品测试中这种方法效果并不理想，因为真 实样品的测定方法必须使用多个离子对 ，离子比率及响应 因子要求也需要满足 EU 标准。IDL 附近浓度水平的测量结 果具有不确定性，很难满足这些标准。因此，定义方法的 定量限 （LOQ） 更为合理。

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