分析三嗪类杀虫剂的实验方法

LC-MS/MS色谱流动相的制备

1M甲酸铵溶液：称取63g甲酸铵，溶于1L HPLC级的水中。

流动相A：在1L水 (HPLC级) 中加入 5mL 1M甲酸铵溶液。

流动相B：在1L甲醇 (HPLC级) 中加入 5mL 1M甲酸铵溶液。

样品制备（水果与蔬菜基质）

基于Anastassiadies等人提出的方法[1]：

1. 称量10g切碎的样品；

2. 加入100µL 内标溶液(D5 - Atrazine 1µg/mL)；

3. 加入10mL乙腈，剧烈振摇；

4. 加入4g无水MgSO4和1g的NaCl；

5. 马上涡旋混合，以防止MgSO4共聚物的生成；

6. 振摇30s后，4300r/min离心5min；

7. 取出1mL初提液，转移至含有150mg无水MgSO4的离心管中；

8. 混合，5200r/min 离心1min；

9. 取出500µL上清液，用水将稀释到1mL，得到提取液浓度约为0.5g/mL。

基LC-MS/MS于Klein和 Alder等人提出的方法[2, 3]：

1. 在5g或10g样品中，加入水到10mL；

2. 加20mL甲醇，使用UltraTurrax 组织匀浆机匀浆2min；

3. 有时需要过滤或离心；

4. 加入NaCl 溶液 (100mL水中含20g NaCl)，每6mL加入NaCl溶液2mL；

5. 用5mL样品溶液浸泡 ChemElut 柱；

6. 5min后，用16mL二氯甲烷洗脱；

7. 40℃挥发至干；

8. 用甲醇与水的混合溶液1.25mL (甲醇0.25mL，水1mL) 重新溶解；

9. 用0.45µm滤膜过滤。

基于Lehotay et al.[4]提出的方法：

1. 使用Molinex 混合器或类似设备匀质水果或蔬菜样品；

2. 加入乙腈，(15.0±0.05)g 匀质的样品加乙腈15mL，超声提取2min后，混旋5min；

3. 加入6g无水MgSO4和1.5g NaCl的混合物，剧烈振摇1min；

4. 3000r/min 离心5min；

5. 取5mL上层溶液，加入1.8g 无水MgSO4和0.3g Bondesil C8 吸附剂；

6. 振摇20s；

7. 使用Eppendorf 5301型浓缩仪，或类似设备挥发至干；

8. 用乙腈/水＝1/9的溶液1mL重新溶解样品；

9. 12000r/min 高速离心2min；

10. 上清液转入自动进样器的进样瓶中备用

色谱分离条件

Agilent 1100 系统：G1312A二元泵系统、G1367A型自动进样器、柱温箱。

色谱柱：Phenomenex Synergi Fusion-RP反相柱，50mm×2mm，粒径4µm，内孔80Å。

流动相：

A相—水+5mM 甲酸铵；

B相—甲醇+5mM 甲酸铵。

梯度设置：

LC-MS/MS液质联用仪检测

API 3200™或3200 QTRAP® LC-MS/MS液质分析系统。TurboIonSpray® 离子源，负离子模式，MRM扫描方式。