液相色谱-质谱联用技术在药物微量杂质分析中的应用

液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术是以HPLC为分离手段、MS为检测器的综合分析技术，集LC的高分离能力与MS的高灵敏度于一体，具有其他分析方法所不能比拟的优点，也是药物杂质分析中的常用技术之一。LC-MS技术也可以随时检测药物合成过程中的中间体、副产物或降解产物。

在药物的研发过程中，药品质量研究的关键问题之一是杂质的控制，任何影响药物纯度的物质都被称为杂质。临床前CRO公司美迪西的分析化学和纯化分离团队可以为客户提供高质量的分析和纯化分离服务。在药物杂质分析中，杂质谱的质控策略是根据药物中的每一个杂质的活性逐一制定质量控制限度，因此更加严格规范。

杂质谱分析主要包括2个方面，一是依据药物结构、理化性质，分析药物合成工艺、制剂工艺中可能产生的杂质；二是考察药物稳定性试验和强制降解试验产生的杂质。因为药物杂质在药物中的含量较低，所以检测手段至关重要，必须选择灵敏度高、专属性强、重复性好的方法。

对于易挥发且热稳定性的物质和残留溶剂的检测，一般使用气相色谱法（GC）。近年来，色谱法在各国药典中得到了广泛应用，其中有关物质分析方法的主流还属液相色谱技术。HPLC测定有关物质的定量方法主要有杂质对照品法(外标法)、加校正因子和不加校正因子的主成分自身对照法以及面积归一化法。如采用HPLC法定量测定艾普拉唑片有关物质，并进行方法学验证。

目前色谱联用技术在药物杂质检测方面有很大的发展潜力。人用药品注册技术要求协调会（ICH）明确规定：每日大剂量不超过2g的原料药中含量大于0.1%的有关物质须鉴定其结构。将色谱法与具有定性能力的光谱法相结合，不仅具有较高灵敏度和选择性，还能够给出丰富的结构信息，提高其结构鉴定能力。

液相色谱-质谱联用（LC/MS）技术主要分为高分辨率质谱（HRMS）、多级质谱、氢/氘转换质谱3类，该技术具有的灵敏度、高选择性和快速的特点，避免了样品复杂的前处理过程，已经成为药物中微量杂质分析和结构鉴定的shou选。

1、HPLC-MS/MS技术在盐酸头孢替安酯药物杂质分析中的应用

采用HPLC-MS/MS联用技术对盐酸头孢替安酯中的未知杂质结构进行分析，经梯度洗脱，使药物的主成分和相关杂质得到有效分离。通过对盐酸头孢替安酯和有关杂质的液相色谱图及液相色谱峰对应的质谱图进行分析和归纳，推测在盐酸头孢替安酯样品中的主要杂质，这为盐酸头孢替安酯的生产、工艺改进和质量控制提供了参考。

2、HPLC/MS联用技术在甲磺酸伊马替尼药物杂质分析中的应用

采用HPLC-MS联用技术对甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质的含量进行测定，并在选择离子检测的模式下灵敏、准确、快速地检测出该基因的毒性杂质，但在检测过程中,要注意不同溶剂对杂质稳定性造成的影响，防止出现假阴性结果。

3、HPLC-MS/MS联用技术在马来酸桂呱齐特原料药杂质分析的研究

采用HPLC-MS/MS联用技术对马来酸桂呱齐特的原料中间体—氯乙酚毗咯烷和一呱嗦乙酚基毗咯烷的含量进行测定，考察在马来酸桂呱齐特原料中两种中间体的残留情况，为特定合成工艺的质量控制和质量标准的建立提供依据，同时，也为无紫外吸收的合成中间体检测和质控提供了参考依据。

4、HPLC-MS联用技术在原料中杂质与制剂中杂质的相关性的研究

在一些原料来源特殊的制剂质量控制中，HPLC-MS联用技术可较好地分辨原料中杂质与制剂中杂质的相关性，为控制制剂质量、工艺优化和合理贮存提供参考。

如氢嗅酸高乌甲素是从植物中提取的有效成分，在纯化过程中，其可能会残留其他生物碱。通过对氢嗅酸高乌甲素原料药进行分析，发现其中有种杂质主要来源于原植物的提取残留。除了注射用粉针剂外，其他注射液均含有原料药中未出现的降解杂质刺乌宁，这可能是由于注射液和葡萄糖注射液在生产工艺中，进行了高温加热灭菌的缘故，从而导致主成分酯键水解断裂，生成了该降解产物。而注射用粉针剂的冻干工艺则有效避免了该杂质的产生，因此该药在生产和贮存过程中，应注意避免温度过高。

HPLC-MS在药物杂质分析中的应用决定了它是控制药物质量的重要分析工具。运用HPLC-MS联用技术进行药物杂质分析，能够为后续的药物杂质分析提供宝贵的经验，值得推广和应用。